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刊期:月刊
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创刊时间:2004年
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药品质量与检验
 
补气生血方药多糖含量测定 2013/3/11
   

  华(山东中医药大学  济南  250355

摘要:目的:建立补气生血方多糖含量测定方法,测定方中多糖的含量。方法:采用硫酸-蒽酮法,无水葡萄糖为对照,在618nm处测定。结果:吸收曲线Y=0.1236X+0.1561R2=0.9985,在0.02020.1212mg/ml范围内线性关系良好,精密度、稳定性、重现性良好,回收率为99.59%。方中多糖含量为25.85%。结论:该方法简单可靠,适于补气生血方药多糖含量的测定。

关键词:补气生血方药  多糖  含量测定

中图分类号: R927.2       文献标识码: B          文章编号:

 

    补气生血方药由黄芪、当归、人参、枸杞组成,是临床经验方。对于多糖药理药效的研究表明,多糖在中药制剂中不应被作为无效成分除去。该方中的四味药都含有大量的多糖,且相关的药理研究也显示了其特有的药效。现对方药中多糖进行测定,为后续成分的提取分离及制剂奠定基础。

1 仪器与试剂

1.1仪器

    UV-3010紫外分光光度计(上海精密科学仪器公司);恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司);高速离心机(上海医疗器械三厂);FA1104型电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司)。

1.2试剂与药材

    当归、黄芪、人参、枸杞(神农大药房,质量符合药典规定);葡萄糖、硫酸、乙醇、乙醚、蒽酮均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)。

2 实验方法与结果

2.1葡萄糖标准液的配制

    精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖20.2mg,加蒸馏水溶解并定容至100ml

2.2多糖供试液的制备[1]

    精密称取处方比例的药材细粉6g,置烧瓶中,加石油醚40ml,回流1h,过滤,残渣用80%乙醇40ml浸渍过夜,回流两次,每次1h,药渣加40ml水,浸渍1h,煎煮3次,每次沸30min,过滤,合并滤液,2500r/min离心20min,上清液浓缩至约6ml80%乙醇沉淀,沉淀用80%的乙醇洗涤后用水溶解并定容至100ml

2.3测定波长的确定

    精密量取葡萄糖溶液0.4ml,置10ml具塞试管中,加水至1.0ml,冰水浴,加入4ml浓硫酸,摇匀,5min后加入1ml 0.2%蒽酮-乙酸乙酯,100℃水浴10min,取出放至室温。蒸馏水对照,在400800nm范围内扫描;另取供试液0.3ml,于100ml量瓶,加蒸馏水至刻度。吸取1ml放入10ml具塞试管中,同法显色并在400800nm范围内扫描。两者在618nm处均有最大吸收,故以618nm进行测定。

2.4线性关系

    精密量取标准液0.10.20.30.40.50.6ml,照2.3项下自“置10ml具塞试管中”开始操作,在618nm测定吸收度,葡萄糖浓度对吸收度回归方程Y=0.1236X+0.1561R2=0.9985,在0.02020.1212mg/ml范围内呈良好的线性关系。

2.5精密度

    精密吸取标准液0.4ml6份,同2.4项下方法测定吸收度,RSD%=1.4,表明精密度良好。

2.6稳定性

    精密吸取标准液0.4ml,于显色后011.522.5h测定吸收度,RSD%=2.2,表明显色后2.5h内稳定。

2.7重现性

    精密称取处方比例的药材6g6份,同2.2项下制备供试液,按2.9项下进行测定,多糖含量RSD%=1.7,表明重现性良好。

2.8回收率

    精密量取供试液(多糖含量14.941mg/ml0.2ml9份,置100ml量瓶中,各加葡萄糖标准液51015ml,混匀,用水稀释至刻度。精取1.0ml,同2.9项下方法测定,平均回收率为99.59%,说明测定结果可靠。

2.9含量测定

    精密吸取供试液0.3ml,置入100ml量瓶加蒸馏水至刻度,吸取1ml放入10ml具塞试管中,冰水浴,分别加入4ml浓硫酸,摇匀,5min后加入1ml 0.2%蒽酮-乙酸乙酯,100℃水浴10min,取出放至室温。蒸馏水对照,在618nm测定吸收度,结果,三批供试液多糖平均含量为25.85%

3  

    本文对补气生血方药中多糖含量进行测定,以建立简单可行重复性好的多糖测定方法。多糖在目前研究较多,研究表明,多糖多有较好疗效。要有效利用多糖,提取与分离就成为了关键问题之一。水提后用80%的乙醇沉淀是应用较多的多糖分离方式,也有在提取前进行脱脂的操作,比较各种提取方法,最终选用了先脱脂再水煎煮的提取方式。

参考文献

[1]冯怡,韩宁,徐德生.麦冬多糖含量测定方法的研究[J].中成药,2006285):705-707.

 
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