今天是:2018/11/19 0:41:02
关于本刊


主管单位:内蒙古自治区食品药品监督管理局
主办单位:内蒙古自治区食品药品学会
编辑出版:北方药学编辑部
刊期:月刊
国内定价:每期12元 ,全年144元
创刊时间:2004年
国内统一刊号:CN15-1333/R
国际标准刊号:ISSN1672-8351
邮发代号:16-421

投稿须知

1.本刊只接收电子版文档,稿件使用word格式,标点正确,格式规范。2.文题一般不超过20字,不用非公知公认的缩写与符号。3.署名3-1署名左顶格写在文题下方,多作者(限6位)之间用空格隔开,作者单位全称及所在省市、邮政编码于括号内写在作者后边。与第一作者不…

联系我们

刊社:北方药学杂志社

社址:呼和浩特市金桥开发区世纪六路

联系电话:

0471-3256158 0471-8938592


投稿邮箱:
nmgbfyx@163.com
beifangyaoxue2010@163.com

博客:http://blog.sina.com.cn/nmbfyx

药品质量与检验
 
活性三七饮片指纹图谱研究及单体皂苷含量测定 2018/10/19
   
活性三七饮片指纹图谱研究及单体皂苷含量测定
贺焕玲(河南省内黄县中医院药剂科  内黄  456300)
摘要:目的:探讨活性三七饮片指纹图谱及单体皂苷含量测定结果。方法:采用高效液相色谱法,检测活性三七药材的五个指标成分含量,分析指纹图谱,并测定单体皂苷含量。结果:传统干燥三七供试液与活性三七供试液67min内均呈现所有成分的色谱峰,指纹图谱峰数无明显变化;相比传统干燥三七药材,活性三七药材中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re及Rd含量明显提升,分别为0.28%、1.84%、1.88%、0.24%、0.45%。结论:活性三七指纹图谱峰能用于活性三七饮片的质量控制,且活性三七饮片中皂苷药效成分可最大限度保留。
关键词:活性三七饮片  指纹图谱  单体皂苷
R286.0
三七是国内常见传统名贵中药材,属于多年生草本植物,多以干品入药[1]。有研究发现,传统经烘烤或日晒加工制备而成的干品三七,挥发油、皂苷等活性成分极易损失,特别是三七总皂苷含量,较鲜品减少28%左右,会给三七药用价值和疗效带来不利影响[2、3]。近年来,临床上有研究采用真空冷冻干燥技术制备活性三七系列产品,能促使鲜三七本色形态得以保持,减少三七成分的损失。当前,临床上针对活性三七皂苷含量测定的研究较多,但仍缺乏对活性三七指纹图谱及单体皂苷的分析与研究[4]。本研究采用高效液相色谱法,检测活性三七药材的指标成分含量,分析活性三七饮片的指纹图谱,现报道如下:
1 仪器与试剂
包括日本岛津公司生产的高效液相色谱仪、上海比朗仪器有限公司生产的BL10-250A超声波清洗机、湖南湘仪实验室仪器开发有限公司生产的TD25-WS台式低速离心机、云南文山同根三七产业有限公司提供的三七饮片、三七道地药材主产区文山提供的传统干燥三七药材以及购自中检所的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re等。
2 方法与结果
①色谱条件:Thermo Scientific Hypersil Gold 色谱柱,以水(A)-乙腈(B)梯度洗脱,以1mL/min为体积流量,以30℃为柱温,以203mm为监测波长。
②制备对照品溶液:取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re及Rd标准品,分别加入甲醇溶液,制备成对照品混合液,确保每毫升分别含R1、Rg1、Rb1、Re及Rd1.07、1.12、1.10、0.96mg及1.14mg。
③制备供试品溶液:精密称取传统干燥三七药材、活性三七饮片各0.6g,浸泡在50mL甲醇中,静置过夜。在75℃条件下,做2h水浴处理,保持微沸状态,冷却,再称定质量,失去的质量以甲醇补足,经0.45µm滤芯过滤,制备成供试品溶液。
④考察线性关系:分别将对照品溶液精密吸取1、2、10、100、500、1000µL,以甲醇定容到1mL,获得对照品混合溶液,分别进样10µL。以峰面积积分值(Y)对进样质量浓度(X)进行线性回归[5]。获得三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re及Rd的回归方程,且上述各皂苷成分均在0.2~1.0mmol/L之间,线性关系良好。
⑤检验指纹图谱:按照“③”制备供试品溶液,分别进样6次,按照“①”色谱条件测定,对指纹图谱进行记录。实施相似度评价,结果显示为≥0.988,提示精密度良好。并分别进行重复性和稳定性试验,均显示效果良好。分别按照“③”将10批活性三七药材和10批传统干燥三七药材制备成供试品溶液,并按照“①”色谱条件进样10µL测定,对各色谱峰相对保留时间和相对峰面积进行记录,并对各色谱峰对应的各皂苷含量进行计算。同时,对比传统干燥三七药材与活性三七药材的含量,结果显示,相比传统干燥三七药材,活性三七药材中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re及Rd含量明显提升,分别为0.28%、1.84%、1.88%、0.24%、0.45%。
⑥建立活性三七饮片与传统干燥三七药材指纹图谱:分别编号10批活性三七药材供试品溶液,依次为S1-S10;分别编号10批传统干燥三七药材供试品溶液,依次为S11-S20。按照“③”制备供试品溶液,根据“①”测定色谱条件,分别对其指纹图谱进行记录。将“⑤”项下生成的对照指纹图谱,与对应样品图片进行相似度考察,对相似度进行计算[6]。结果显示,相比各自对照指纹图谱,传统干燥三七药材与活性三七药材指纹图谱相似度在0.90以上。实验还对比了活性三七根头、活性三七颗粒、活性三七切片的指纹图谱,结果显示,与对照图谱相比,相似度分别为0.997、0.973、0.981,提示该指纹图谱可适用于不同活性三七饮片。
3 讨  论
本研究对活性三七皂苷类成分的指纹图谱进行创建,所用方法的精密度、重复性与稳定性均处于良好状态。活性三七饮片图谱标定的共有峰包括8个,它们之间相似度在0.90以上,提示各批次之间图谱差异不显著。同时,还确定了另外两种人参皂苷Rd、人参皂苷Re的指纹图谱。
本研究还对比传统干燥三七药材与活性三七饮片的指纹图谱化学轮廓,结果显示,传统干燥三七供试液与活性三七供试液67min内均呈现所有成分的色谱峰,指纹图谱峰数无明显变化,提示活性三七指纹图谱峰能用于活性三七饮片的质量控制。
此外,本研究还发现,相比传统干燥三七药材,活性三七药材中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re及Rd含量明显提升。三七皂苷类成分中含糖苷键。传统的三七经由烘烤或日晒处理,极易导致加工过程中皂苷成分受热分解,导致皂苷含量损失[7]。活性三七经由冻干方法进行制备,能最大限度保留皂苷药效成分[8]。本研究中,相比传统干燥三七药材,活性三七饮片的5种皂苷含量总合高出4.61%。
本研究还考察了不同活性三七饮片的指纹图谱,结果显示,活性三七根头、活性三七颗粒、活性三七切片的指纹图谱与对照图谱相比,相似度分别为0.997、0.973、0.981,且不同活性三七饮片产品之间指纹图谱差异不显著,提示该生产工艺有着较好的稳定性。此外,还表明该研究能为活性三七产品的质量控制提供一定理论依据。
综上所述,活性三七指纹图谱峰能用于活性三七饮片的质量控制,且活性三七饮片中皂苷药效成分可最大限度保留。
参考文献
[1]李琳,王承潇,崔秀明,等.活性三七饮片指纹图谱研究及单体皂苷含量测定[J].云南大学学报(自然科学版),2014,36(4):551-556.
[2]闫珂巍.三七粉末饮片的质量控制及三七总皂苷提取纯化工艺研究[D].四川:成都中医药大学,2016:25-26.
[3]王勇,余育启,陈士林,等.三七药材及饮片农药残留与重金属含量限量标准研究[J].世界科学技术(中医药现代化),2016,18(11):1955-1963.
[4]李琳,王承潇,崔秀明.活性三七药材质量特征研究[J].安徽农业科学,2014,42(35):12457-12460.
[5]李琳,崔秀明,王承潇,等.活性超微三七粉质量特征研究[J].云南农业大学学报,2016,31(2):232-238.
[6]徐家翠.浅谈中药三七及其有效成分对血液系统的药理活性研究概况[J].中国继续医学教育,2015,7(1):184-185.
[7]高明菊,马妮,张鹏,等.蒸制熟三七粉饮片质量标准研究[J].医学信息旬刊,2013,26(12):211-212.
[8]白宗利,乐智勇,卢翠敏,等.不同粉碎度三七粒度分布和皂苷类成分溶出曲线研究[J].中国现代中药,2016,18(3):362-365.
 
电子邮箱:nmgbfyx@163.com 编辑QQ:764016241 网站策划:先诚网络科技
内蒙古·呼和浩特市·北方药学杂志社 蒙ICP备10201100号 您是第[1343569]位访问者 蒙公网安备 15010202150162号 进入后台